Qubit检测中遇到的问题查缺补漏

您在Qubit检测中遇到了除“标准品错误”以外的其它试剂盒相关问题。

这里有一些建议，不知对您是否有帮助，一起看看吧
1.在“查看标准品”或"查看校准"下查看标准品的原始荧光值（RFU）。确认样本的荧光值落在标准品的荧光值之间（或稍稍高于最高的标准品）。如果不是，那么样本已经超过了检测的精确范围。请参看产品目录中的各个检测试剂盒的置信区间。如果检测样本超过了置信区间，那么检测读数将是2位有效数字而不是3位。 要使样本进入准确测定范围，可稀释样本或使用更多或更少体积的样本（例如，如果样本读值较低的话，使用10 µL而非2 µL）。
2.检查温度因素。检测是温度敏感性的，荧光信号在较高温度时会减弱。样本之间或样本和标准品之间的温度波动可能引发问题。
确保缓冲液和保存在DMSO内的Qubit试剂处于室温。缓冲液和Qubit试剂应保存于室温，而不是冰箱内。保存于 4°C的缓冲液即使在室温放置2–3小时仍然不能达到室温。
确保你的样本和工作溶液不能过热（包括刚从离心机取出时）。保留在Qubit仪器内过久或多次读取的样本可能会升温。如果你想对一个试管多次读数，你应该将它从仪器内取出，放置30秒以平衡至室温，然后进行下一次读数。另外，在读数之前，不要将试管握在手中过长时间，因为这会加热样本，使读数变低。
3.确保正确制备Qubit工作溶液（使用试剂盒内的缓冲液1:200稀释）。确保正确制备标准品（10 µL标准品加入到190 µL工作溶液中）。确保试管中加入至少200µL液体（对于标准品和样本均是如此）。
4.确保你使用的试剂和标准品是6个月之内的，并且标准品保存方法正确。Qubit试剂存储溶液应尽可能避光保存。
5.确保在Qubit荧光计上选择的程序跟你所用的Qubit检测试剂盒是匹配的。
6.读取标准品和样本数值时，确保仪器的盖子关闭。
7.使用推荐的检测管（检测管不能阻挡仪器盖上盖子，并且检测管应当光学透明）。某些类型的检测管可能有较高的自发荧光而影响检测。
8.你在Qubit仪器中输入你所加入到工作溶液中的存储液的微升数了吗？如果输入了，那么Qubit荧光计获得此信息后给出的浓度是你的存储液的浓度。如果没有输入，那么你得到的浓度是检测试管（你放入Qubit荧光计的试管）内的浓度——不是你的存储液浓度。
9.如果你是将Qubit检测的结果和使用UV吸光值获得的浓度进行比较，并且基于UV吸光值的浓度显著较高，那么可能是因为核酸或蛋白污染。Qubit检测试剂对于DNA, RNA和蛋白的检测特异性比吸光值测定法高得多。