技术前沿 | 如何快速穿包装鉴别寡核苷酸初始物料？

新冠疫情中，一般采用如聚合酶链反应（PCR）快速检测是否存在 SARS-CoV-2 。PCR 检测的目标是由亚磷酰胺为主体合成的核苷酸或者短链 RNA/DNA 分子。 亚磷酰胺单体的排列、化学改性以及数量赋予 RNA/DNA 序列特定靶向，应用于疾病筛查、生物医学研究和刑事等领域。在过去几年，寡核苷酸应用与日俱增，满足质量要求的供应链日趋紧张。在 cGMP 环境下，对合成寡核苷酸的初始物料，在物料接收处进行鉴别，以保持质量标准。这是在寡核苷酸生产流程中防止原料掺假或引入劣质原料的道防线。

本文介绍安捷伦 vaya 手持拉曼用于鉴别合成寡核苷酸的商品化物质---亚磷酰胺。实验证明，在 cGMP 环境下 Vaya 可穿透透明或不透明容器有效鉴别和区分生物制药的原辅料。

Agilent Vaya 手持拉曼采用空间位移拉曼（SORS）技术，可以直接穿透透明和不透明的容器鉴别原辅料（如图 1 ），还可以准确区分类似物，例如非对映异构体、位置异构体、多晶型等。

Vaya 直接穿透棕色玻璃瓶测试的五种亚磷酰胺（采购于 Sigma Aldrich），测试谱图如下：

从图 2 看出，c 和 d 的两种亚磷酰胺在 1000-1500cm^-1 范围有明显特征峰，容易和其他四种亚磷酰胺区分，而其他三种亚磷酰胺就很相似，对于拉曼鉴别就具有一定挑战。Vaya 手持拉曼采用双参数 R² 和 LMC 同时评判测试结果是 Pass 还是 Fail ，相比单一参数评判，更容易区分相似组分。更重要的是，Vaya 在建模过程中还具备添加相似组分的功能，让其区分相似组分的能力更加强大。