分光光度计知识——析谱告诉您

分光光度计知识普及
 

对于分光光度计我们应用比较广泛，但是了解甚少，在此为大家介绍一下分光光度计的有关知识，希望能够更好的了解以及应用。

分光光度计原理：是利用分光光度法通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度对该物质进行定性和定量分析。

分光光度计主要组成由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。

1.分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为：可见光分光光度计，紫外分光光度计，红外分光光度计，荧光分光光度计，原子吸收分光光度计。

可见光分光光度计测定波长范围为320-760的可见光区
紫外分光光度计测定波长范围为200-400nm的紫外光区
红外分光光度计测定波长范围为大于760nm的红外光区
荧光分光光度计用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱
原子吸收分光光度计光源发出被测的特征光谱辐射被经过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收通过测定特征辐射被吸收的大小来求出被测元素的含量。

不同种类的分光光度计的基本原理相似都是利用一个可以产生多个波长的光源通过系列分光装置从而产生特定波长的光源。光源透过测试的样品后部分光源被吸收通过测量样品的吸光值经过计算可以转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 

2.分光光度计按自动化程度分类可分:为手动、半自动、自动分光光度计。 

3.分光光度计按软件可分为:带扫描、不带扫描。

分光光度计使用的就是TU-1810紫外可见分光光度计。

根据紫外可见分光光度计的仪器结构可以分为三类：单光束分光光度计、双光束分光光度计和双波长分光光度计。

1、单光束分光光度计

单光束是指从光源今发出的光，经过单色器等—系列光学元件，通过吸收池，后照在检测器上时，始终为一束光。它只官一束单色光(光束只能交替通过参比溶液、样品溶液)，一只比色皿，一只光电转换器。工作时，一条光路，先通过多比溶液，再通过试样溶液进行光强度的测旦。　　

单光束分光光度计的特点是结构简单、价格低，主要适用于做定量分析，测量结果受电源的波动影响较大，容易给测量结果带来较大的误差。所以，它们在位灼上受到限制。一般来讲，要求较高的制药行业、质量检验行加等不适宜使用单光束紫外可见分光光度讣。

2、双光束分光光度计

双 光束分光光度汁就是有两束单色光的紫外可见分光光度计。其光路设计基本上与单光束分光光度计相似。区别是在单色器与吸收弛之间加了一个切光器，其作用是以 一定的频率把一个光束交替分为强度相等的两柬光，使一路通过参比溶液，另一路通过样品溶液。然后由检测器交替接收参比信号和样品信号。接收的光信号转变成 电信号后，由前置放大器放大，并进一步解调、放大、补偿等，后由显示系统显示。

3.双 波长分光光度计采用两个单色器，可以同时得到两柬波长不同的单色光，其光路. 光源发出的光被两个单色器分别分离出波长为4：和4z的单色光，通过切光 器，将两束光以一定的时间间隔交替照射到装有样品试液的同一个吸收池，由检测器显示出试液在波长4?和42的透射比或吸光度。双波长分光光度计不仅能测量 高浓度试样、多组分混合试样，而义测定混浊样品时比单波长测定更灵敏、更有选择性。双波长测定时，两个波长的光通过同一吸收池，pJ以消除因吸收他的参数 不同、位置不同、污垢以及制备参比溶液等带来的误差，从而可以显著地提高测定的准确度。

单光束分光光度计：由一束经过单色器的光，轮流通过参比溶液和样品溶液，以进行光强度测量，主要适于做定量分析。

双光束分光光度计：以两束光一束通过样品、另一束通过参考溶液的方式来分析样品的分光光度计。这种方式可以克服光源不稳定性、某些杂质干扰因素等影响，还可以检测样品随时间的变化等。 

双光束分光光度计操作规程

1.接通电源，打开TU-1901plus 双光束紫外可见分光光度计开关，预热15分钟。

2.根据自己样品所需，选择要分析的波长，。

3.将空白液及测定液分别倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外壁，先空白（参比）调100%/0.000A，然后放样品测值

4.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。

【应用范围】

可广泛应用于生命科学、化工、制药、质量检验、环境保护等方面

【注意事项】

为了防止腐蚀性气体进入光电管，测试完毕取出样品，并搽干净样品室内残留液体。

取拿比色皿时，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰比色皿的光学表面。

比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛刷清洗，可以用污水乙醇，棉签试搽比色皿透光面。

比色皿外壁附着的水或溶液应用擦镜纸或细而软的吸水纸吸干，不能划伤比色皿透光面。