超微量分光光度计的工作原理及应用
1. 引言
超微量分光光度计(Nano spectrophotometer)是一种基于紫外-可见光(UV-Vis)分光光度法的高精度检测仪器,广泛用于生物医学、环境分析和材料科学等领域。其主要优势在于可测量极微量样品(0.5–2 µL),无需比色皿,大大降低了样品损耗。本文将详细介绍其工作原理及应用。
2. 工作原理
2.1 光源与光谱测量
超微量分光光度计通常采用氙灯或LED作为光源,覆盖200–900 nm的波长范围。光束穿过待测样品后,未被吸收的部分由检测器(如光电二极管或CCD阵列)接收,以计算样品的吸光度。
2.2 比尔-朗伯定律
光吸收特性遵循比尔-朗伯定律(Beer-Lambert Law):
其中:
为吸光度
为摩尔消光系数(与物质特性相关)
为溶液浓度(mol/L)
为光程长度(cm)
超微量分光光度计通常采用固定光程(如0.5 mm 或 1 mm),可直接计算样品浓度,无需额外稀释。
2.3 样品检测方式
与传统分光光度计不同,超微量分光光度计采用纳米样品平台(NanoDrop技术),通过表面张力固定微量液滴(如1 µL),无需比色皿,从而减少样品浪费。
3. 主要应用
3.1 核酸检测
DNA/RNA浓度测定:通过测量260 nm波长的吸光度(A260)计算核酸浓度。
纯度评估:常用A260/A280比值(≈ 1.8 表示纯DNA,≈ 2.0 表示纯RNA)判断蛋白质污染。
3.2 蛋白质分析
通过280 nm波长测定蛋白质吸光度(A280)。
利用布拉德福德法(Bradford Assay)或双缩脲法(BCA Assay)进行定量分析。
3.3 其他应用
细胞培养液的浓度测定
纳米材料溶液的光学特性分析
环境样品(如水污染物)的检测
4. 结论
超微量分光光度计以其高灵敏度、低样品需求和便捷操作的特点,在生命科学和材料研究领域具有广泛应用。随着技术的发展,其检测精度和自动化水平将进一步提高,为科学研究和工业生产提供更加高效的分析工具。
免责声明
- 凡本网注明“来源:化工仪器网”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-化工仪器网合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:化工仪器网”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源(非化工仪器网)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。