在临床检验应用中采用横向加热技术石墨炉和塞曼效应 背景校正测定血中铅

前言在临床检验应用中能够准确检测出血中铅含量的的仪器是保障职业安全和公共卫生的可靠支持。美国疾病预防控制中心（CDC）规定血中铅含量不得高于10 μg/dL[1]。但是，目前还不知道究竟血中铅浓度达到多少会对人体产生危害，在临床检验应用时能够提供准确数值和精确测量的仪器也是很重要的。在临床检验应用中采用横向加热技术石墨炉和塞曼效应背景校正测定血中铅原子吸收应 用 文 章临床检验测定全血一般采用石墨炉原子吸收光谱法（GFAAS）。GFAAS具有成本效益，其检出限远低于CDC规定血铅浓度水平，而且相比于其他更先进的元素分析技术，ＧＦＡＡＳ对操作人员的要求更低［２］。在本研究中，我们将对使用恒温平台石墨炉 （ＳＴＰＦ）和横向加热石墨管（ＴＨＧＡ）技术的PerkinElmer® PinAAcle™ 900T原子吸收光谱仪在临床检验中测定血液样品中铅含量的应用性进行验证。试验为了简化和减少分析时间，没有使用与样品基体匹配的血液标准和标准加入法制作校准曲线，而采用水标准溶液。

实验试剂准备所有试剂、标准和样品均采用ASTM®I类去离子水(18MΩ • cm) 配制。浓硝酸（HNO3）（69-70%）为痕量金属级或更高[3]。10% Triton® X-100储备液：直接在125mL LDPE瓶中称取10克Triton® X-100润湿剂(Part No. N9300260)，去离子水定容至100克，摇匀。自动进样器清洗溶液：保证2L的自动进样器清洗瓶中一直有去离子水，加入4mL浓硝酸和100 μL10%Triton® X-100溶液，摇匀。稀释剂/基体改进剂溶液：吸取1mL10%磷酸二氢铵（NH4H2PO4，基体改进剂(Part No.N9303445)），加入到60mL LDPE瓶中，然后加入2.5 mL10% Triton®X-100储备液和0.1 mL浓硝酸，最后用去离子水稀释至50mL。1% HNO3溶液：在1L塑料容量瓶中先加入大约500mL去离子水，然后加入10mL浓硝酸，去离子水稀释定容至刻度。标准溶液中间液(10 mg/L)：吸取1mL1000mg/L铅标准溶液储备液(PerkinElmer Pure, Part No. N9300175)到125mLLDPE瓶中，用1% HNO3定容至100g。每月配制。

标准溶液配制和样品处理在4个干净的100mL塑料瓶中分别加入1, 2, 4, 6 mL10mg/L的标准溶液，然后用1% HNO3稀释定容至刻度，则配制的二级标准溶液浓度分别为100, 200, 400, 和 600μg/L。校准曲线标准溶液：在4个1.2 mL干净的自动进样器样品杯中分别吸取上述二级标准溶液各100μL，然后各加入900 μL稀释剂/基体改进剂溶液。在自动进样器样品杯中用移液器枪头反复吹打5-10次以混匀样品杯中的溶液。空白溶液的配制使用1% HNO3溶液按相同步骤进行。样品使用NIST®山羊血中微量元素(SRM955c)和LyphoChek全血金属对照浓度1、2、3 (BioRad, 加州Hercules)。在1.2 mL自动进样器样品杯中直接吸取100 μL样品和900μL稀释剂/基体改进剂溶液，照上述方法混匀

仪器条件实验所有的测量都使用PinAAcle 900T火焰和纵向塞曼石墨炉原子吸收光谱仪。光源使用PerkinElmerLumina™ Pb单元素空心阴极灯(Part No. N3050157)，气体类型为氩气。PinAAcle 900T的仪器设置列于表1，所有样品测定的石墨炉程序列于表2。

虽然本实验校准曲线最大浓度做到60 μg/dL (图 4a)，但是研究发现仪器的线性可达到120μg/dL或者更高(图4b)。这就为分析高浓度样品时减少稀释倍数提供了一种方法。多次测定血液稀释溶液得到的检出限约为0.23μg/dL (3SD)。由表3可见，测定4个浓度的NIST®标准物质955c-山羊血中有毒金属的回收率在98-102%范围内；而由表4可见，测定3浓度BioRad LyphoChek比对样品的回收率在100-106%范围内。所有实验结果均在标准物质推荐的范围内。

AS 900自动进样器的使用保证了样品传输的准确性。AS 900自动进样器探针在分析时不需要为了防止高浓度样品对后续样品的残留污染而进行任何清洗或维护。而且能够在需要时对超过校准曲线范围的样品进行自动稀释。

结论本文介绍了如何利用我们的仪器在临床检验中测定血中Pb含量的实例。通过使用带有恒温平台石墨炉(STPF)、石墨炉横向加热（THGA）系统的PinAAcle900T原子吸收光谱仪，使得临床检验中快速、准确测定Pb成为可能。较宽的线性范围既能满足测定远低于临界值10 μL/dL的样品，也能满足临床和研究中测定较高浓度的需求。PinAAcle 900T原子吸收光谱仪非常适合临床检验测定血中铅含量。